Ako Light mikroskopy Work

vytvorenia obrazu. Čím silnejší vzorka, tým menej svetla prechádza. Čím menej svetla, ktoré prechádza, tým tmavší je obraz. Z tohto dôvodu musí byť tenké vzorky (0,1 až 0,5 mm). Mnoho žijúci vzorky musia byť nakrájame na tenké úseky pred pozorovaním. Vzorky hornín alebo polovodiče sú príliš silné byť rozrezané a pozorovať v prechádzajúcom svetle, tak oni sú pozorované svetlo odrazené od ich povrchov.
Fluorescenčné mikroskopia

A fluorescenčný mikroskop používa ortuť ani xenónovou lampu produkujú ultrafialové svetlo. Svetlo prichádza do mikroskopu a zasiahne dichroické zrkadlo - zrkadlo, ktoré odráža jednu radu vlnových dĺžok a umožňuje ďalšie rozsah prejsť. Dichroické zrkadlo odráža ultrafialové svetlo až do vzorky. Ultrafialové svetlo vzrušuje fluorescencii v rámci molekúl vo vzorke. Šošovka objektívu zhromažďuje fluorescenčné vlnovej dĺžky svetla produkoval. Tento fluorescenčné svetlo prechádza dichroické zrkadlo a bariérovú filtrom (ktorý odstraňuje iné ako fluorescenčné vlnovej dĺžky), takže je na okuláru pre vytvorenie obrazu.

Fluorescenčné molekuly vo vzorke môže byť buď prirodzene vyskytujú alebo môžu byť zavedené , Napríklad, môžete škvrna bunky s farbivom volal kalceínu /AM. Sama o sebe táto farbivo nie je fluorescenčné. AM časť molekuly skrýva časť kalceínu molekuly, ktorá sa viaže vápnik, čo je fluorescenčné. Pri zmiešať kalceínu /AM sa roztok na kúpanie bunky, farbivo kríža do bunky. Živé bunky majú enzým, ktorý odstráni AM časť, lapáky kalceínu v bunke, a umožňuje kalceínu viazať vápnik tak, aby sa fluoreskuje zeleno pod ultrafialovým svetlom. Mŕtve bunky už nemajú tento enzým. Preto sa živé bunky fluoreskujú zelene, a mŕtve bunky nebudú fluoreskujú. Môžete vidieť mŕtve bunky istej vzorke, keď zmiešate v inom farbivo zvanej propidiumjodidom, ktorý preniká iba odumreté bunky. Propidium jodid sa viaže na DNA v jadre a fluoreskuje červeno pod ultrafialovým svetlom. Tento double-farbivo technika sa používa v toxikologických štúdiách na stanovenie percenta bunkovej populácie, ktorá je zabitý, keď reaguje s nejakým chemickým v oblasti životného prostredia, ako je napríklad pesticíd.
Fluorescenčné obraz kultivovaných rat-mozgových buniek. Živé bunky škvrna s kalceínu (vľavo) a odumretých buniek škvrnu propidiumjodidom (vpravo).
Foto so zvolením Theresa M. Freudenrich
fluorescenčného obrazu kultivovaných potkaních-mozgových buniek. Živé bunky škvrna s kalceínu (vľavo) a odumretých buniek škvrnu propidiumjodidom (vp