Získavanie vedomostí
/ Knowledge Discovery >> Získavanie vedomostí >> veda >> prírodné vedy >> forenzná veda >>

Ako DNA profilovanie Works

ícii pre analýzu a kvalitu a množstvo vzorky dostupných DNA.

Prvá metóda pre vytváranie profilu DNA bola RFLP, alebo reštrikčné fragment dĺžka polymorfizmus. RFLP sa nepoužíva tak často, dnes, pretože to vyžaduje veľkú vzorku DNA, - až o 25 vlasy alebo niklu veľkosti mieste telesné tekutiny, - a môže trvať tak dlho, kým jeden mesiac pre dokončenie [zdroj: Baden]. To tiež vyžaduje preskúmanie niekoľkých úseky DNA reťazca nájsť variácie, čo je časovo náročné a ponecháva väčší priestor pre ľudské chyby. Niektoré z krokov pre analýzu RFLP sa používajú aj v iných typov profilovanie DNA. Pre RFLP, kroky sú:

  1. Samostatné biele a červené krvinky s odstredivky.
  2. Výťažky z DNA jadra z bielych krviniek. To sa vykonáva tým, kúpanie buniek v horúcej vode, potom sa pridá soľ, a uvedenie zmes späť do odstredivky [zdroj: University of Arizona].
  3. Vystrihnúť reťazec DNA na fragmenty pomocou reštrikčnej enzým.
  4. Place fragmentov do jedného konca lôžka agarózovom géle s elektródami v ňom. Agarózovom gélu je vyrobená z agar-agar, typ morských rias, ktorý sa zmení na želatínu, keď sa rozpustí vo vriacej vode.
  5. Pomocou elektrického prúdu triediť DNA segmenty podľa dĺžky. Tento proces sa nazýva elektroforézou na agarosovém gélu. Elektroforéza sa vzťahuje k procesu postupu sa negatívne nabité molekuly prostredníctvom gélu s elektrickým prúdom. Kratšie úseky vzďaľujete od ich pôvodného umiestnenia, zatiaľ čo tie dlhší pobyt bližšie. Segmenty zladiť v rovnobežných radoch.
  6. Použiť list nitrocelulózy alebo nylonu sa vymaž DNA. List sa zafarbia, takže rôzne dĺžky DNA pásov sú viditeľné voľným okom. Spracovaním list s žiarením, je vytvorený autoradiograf. To je obraz na röntgenový film zanechané rozpadu vzoru žiarenia. Autoradiograf, s jeho charakteristickými tmavých paralelných pásov, je profil DNA.

    PCR (polymerázová reťazová reakcia), analýza je obvykle prvý krok pri vytváraní profilu DNA, ktoré dnes. PCR sa môžu replikovať malé množstvo DNA, čím sa vytvorí väčší vzorky na analýzu. Robí to pomocou opakujúci sa proces, ktorý trvá asi päť minút. Po prvé, je DNA polymeráza tepelne stabilný - špeciálny enzým, ktorý sa viaže na DNA a umožňuje replikáciu - pridá sa. Potom sa vzorka DNA sa zahrieva do 200 stupňov F (93 ° C) pre oddelenie závitov. Potom sa vzorka ochladí a znovu ohreje. Ohrievanie zdvojnásobí počet kópií. Potom, čo tento proces sa opakuje cca 30-krát, je dostatok DNA pre ďalšiu analýzu.

    PCR je

    Page [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7]